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多聚半乳糖醛酸酶（EC3.2.1.15）是一种细胞壁结合蛋白，可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解，参与果胶的降解，使细胞壁结构解体，导致果实软化，与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御，细胞伸展发育以及木质化有关，在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。

多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸，具有还原性醛基，与DNS试剂反应生成红棕色物质，在540nm有特征吸收峰，测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。

• 组织样本：按照组织质量(g)∶提取液体积(mL)＝1∶5～10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。16000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
  
• 细菌、真菌样本：按照细胞数量(10⁴个)∶提取液体积(mL)＝500～1000∶1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后16000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。
  
• 培养液样本：直接检测。

• 按下表向反应管中加入各成分：
  

  成分(μL)	对照管	测定管
  样本	100	100
  试剂一		400
  蒸馏水	400

• 40℃水浴30min。
  
• 向反应管中加入500μL试剂二。
  
• 沸水浴5min，冰浴或自来水冷却。
  
• 蒸馏水调零，1mL玻璃比色皿测定540nm处吸光值A，△A＝A_测定管－A_对照管。每个测定管设一个对照管。
  • 吸光值如果超过2，需要将上清用水适当稀释后测定，并在计算结果中乘以相应倍数。

• 按照蛋白浓度计算
  酶活性定义：在40℃，pH6.0条件下，每毫克蛋白每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
  PG活性(mg/h/mgprot)＝(ΔA＋0.008)÷3.9642×V_反总÷(V_样×Cpr)÷T＝2.523×(ΔA＋0.008)÷Cpr
  
• 按照样本质量计算
  酶活性定义：在40℃，pH6.0条件下，每克样本每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
  PG活性(mg/h/g鲜重)＝(ΔA＋0.008)÷3.9642×V_反总÷(V_样×W÷V_样总)÷T＝2.523×(ΔA＋0.008)÷W
  
• 按液体体积计算
  酶活性定义：在40℃，pH6.0条件下，每毫升培养液每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
  PG活性(mg/h/mL)＝(ΔA＋0.008)÷3.9642×V_反总÷V_样÷T＝2.523×(ΔA＋0.008)
  
• 按细胞数量计算
  酶活性定义：在40℃，pH6.0条件下，每10⁴个细胞每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
  PG活性(mg/h/10⁴cell)＝(ΔA＋0.008)÷3.9642×V_反总÷(V_样×细胞数量÷V_样总)÷T＝2.523×(ΔA＋0.008)÷细胞数量

• V_反总：反应总体积，0.5mL；
  
• V_样：反应中样本体积，0.1mL；
  
• V_样总：加入提取液体积，1mL；
  
• Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
  
• W，样本质量，g；
  
• T：反应时间，0.5h。